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0.23± 0.13
0.03±0.01
cd3ak
1.21±0.24
1.04±0.24
0.86±0.16
0.65±0.12
注：n＝10，p＜0.01
二、cd3ak抗胃癌细胞株mnk45作用的检测
1.cd3ak体外杀伤mnk45的作用：我们选了7位健康献血者，采其外周血。每个献血者的血分为4份，分别制备cd3ak、lak、atc 及pbmc＋无关抗体3g1/3f8，后者作为对照，用4小时51cr释放法测定其对mnk45的杀伤活性，结果用配对t检验统计处理。cd3ak与lak之间差异有显著性意义（p＜0.01）；atc及3g1/3f8＋pbmc基本无效（表3）。
2.裸鼠体内试验：
(1)皮下瘤结节生长情况：肿瘤细胞对照组4只裸鼠于皮下接种癌细胞后第1周，皮下均长出直径为0.5cm左右的瘤结节，至第4周，直径平均长至2.5cm左
表3各种效应细胞对人胃癌细胞mnk45的杀伤作用（x±s）
效应细胞 靶细胞
组别
10:1
20:1
40:1
cd3ak
37.97±1.95
47.97±2.05
56.30±2.34
lak
9.58±2.05
15.85±1.25
33.32±2.00
atc
2.34±1.25
5.67±2.12
12.78±2.51
pbmc±3g1/3f8
0.63±0.22
0.95±0.34
3.25±1.01
右，表面高低不平；lak细胞对照组4只全部长出肿瘤结节，肿瘤生长情况基本同肿瘤细胞对照组；cd3ak细胞组，至第5周仍无一只生长肿瘤。
(2)裸鼠生存期观察：肿瘤细胞和lak细胞对照组至第33天已死亡7只，至第40天8只全部死亡，而cd3ak组在第55天时4只仍全部健康生存。
讨 论
il-2/lak在肿瘤的过继免疫治疗中已获得一定成功，til、a-lak及nk细胞也已用于某些肿瘤病人的治疗，但其共同的缺点是：没有足够量的效应细胞以及加用大量ril-2所带来的严重副作用。近年来cd3单抗诱导的杀伤细胞cd3ak的出现，为解决上述问题提供了有效的方法。文献报道及本研究结果均表明，cd3ak不仅对肿瘤细胞有很高的细胞毒活性，对外源性il-2依赖性小，而且能迅速大量扩增，可长期培养且维持其活性。
cd3ak杀伤肿瘤及增殖的机理可能有以下几点：①cd3单抗识别t细胞表面的tcr/cd3复合体而引起细胞因子的产生，如tnf、ifn-r等，细胞因子有杀伤肿瘤的作用。②通过产生内源性il-2、il-4而起作用。③使cd3ak的il-2r(il-2受体)表达增加，对il-2的反应增强，从而使细胞分裂增殖及细胞毒活性增强。因此，cd3ak在体内、外杀伤肿瘤时，对外源性il-2的需要量少。
胃癌对il-2lak疗法不敏感，且cd3ak对胃癌的治疗还未见报道。本研究结果表明，少量血及低浓度ril-2制备的cd3ak细胞，在体外对胃癌有较强杀伤作用，并能有效地抑制裸鼠体内mnk45的生长及显著地延长裸鼠生存期，而lak细胞则无明显效果。因此我们认为，cd3ak可望解决胃癌的继承性免疫治疗中效应细胞量不足、效果差及需大量ril-2的问题，有很大的实用价值。
131i-花生凝集素对裸鼠载人胃癌的靶向定位和治疗作用
1甘润良 2薛 琼 2江贤鹏 1李一琴 1王宗保 1许金华
1湖南衡阳医学院肿瘤研究所 421001 2上海医科大学中山医院
本文根据受体-配基特异性亲合理论，报道以花生凝集素pna为载体与131i结合物对祼鼠载人胃癌进行靶向定位和治疗的实验研究结果。
1 材料和方法
1.1 核素标记凝集素
1.2 祼鼠人胃癌模型
1.3 组织分布测定
接种人胃癌移植瘤的祼鼠32只，动物随机分为两组。实验组腹腔注射131i-pna标记物，对照组腹腔注射na 131i，放射剂量均为3.7 mbq (100μ ci)。在给药后1，3，5，7天分批处死动物，每批实验组处死5只，对照组处死3只。取各主要脏器和移植瘤，称重，计数以测定其放射性，并计算靶（t，肿瘤）与非靶（nt，对照部位）摄取放射性的比值（t/nt）。
1.4 放射性核素显像
荷瘤祼鼠5只，随机取出3只，腹腔注射131i-pna标记物11.1mbq；另外2只注射同样剂量的na 131i。在注射后24，48，72，120小时进行放射性核素断层显像（ect，dgema-500）。
1.5 荷瘤祼鼠体内治疗研究
1.5.1 动物分组及给药方法：采用单次较大剂量治疗。将荷瘤祼鼠随机分为五组，每组5只。a组为实验治疗组，腹腔注射131i-pna标记物18.5 mbq/100μl。b、c、d三组为治疗对照组，b组腹腔内注射131i-nmigg标记物18.5 mbq/100μl，c组腹腔内注射未标记pna 100μg/100μl，d组腹腔内注射单纯na 131i18.5 mbq/100μl。e组为非治疗对照组，腹腔内注射生理盐水100μl。
1.5.2 肿瘤抑制效应的观察：①肿瘤抑制率：采用双盲法，在治疗前后每周定时测量肿瘤的最长径（a）和最短径（b），按照v=0.4×ab2的公式计算肿瘤体积（cm3）。并按下列公式计算肿瘤抑制率（ir），数据比较采用t检验。②生存期：接受治疗当天自然死亡之日的天数。
（非治疗组-治疗组）平均肿瘤体积
非治疗组平均肿瘤体积
1.5.3 辐射损伤（毒性）的检测：①组织病理学检查：动物6只，分别于接受131i-pna后第7天、28天和56天各处死2只；留作长期观察的带瘤裸鼠待实验动物死亡或涉死状态进处死。分离肿瘤及祼鼠器官组织，称重后用10%福尔马林溶液固定，作常规病理检查。②定期测理祼鼠体重；以末体重/初体重（fbw/ibw）作评价。当fbw/ibw%26gt;0.80判断无毒性，fbw/ibw%26lt;0.80判断有毒性反应。③观察治疗前后白细胞计数的变化：治疗前和治疗后每周从尾部采血作白细胞计数，判断辐射对宿主造血功能的影响。